ED Sciences de la Vie et de la Santé
Impact des interférons de type I sur le phénotype et la fonction des mélanocytes au cours du vitiligo
par Ribal MERHI (Immunologie Conceptuelle, Expérimentale et Translationnelle)
Cette soutenance a lieu à 14h00 - Amphithéatre Université de Bordeaux Campus Carreire, Bat BBS, RDC 2, Rue du Dr Hoffmann Martinot, 33000 Bordeaux
devant le jury composé de
- Julien SENESCHAL - Professeur des universités - praticien hospitalier - ImmunoConcEpT CNRS UMR5164 - Directeur de these
- Christine VARON - Professeur des universités - BRIC Inserm U1312 - Examinateur
- Christine BALDESCHI - Professeur des universités - INSERM/UEVE UMR 861, I-STEM, AFM - Rapporteur
- Bouaziz JEAN-DAVID - Professeure des universités - praticienne hospitalière - Institut de recherche Saint Louis INSERM U976 HIPI - Examinateur
- Jérémy DI-DOMIZIO - Chargé de recherche - Université de Lausanne, Gilliet-LAB - Rapporteur
Le vitiligo est l'affection dépigmentante la plus fréquente de l'adulte caractérisée par la perte des mélanocytes et associée à une réponse immunitaire de type 1. Des anomalies intrinsèques des mélanocytes ont été décrites, telles que des taux élevés d'espèces réactives de l'oxygène, induisant l'expression de gènes associés à la sénescence. Il est établi que la réponse auto-immune dirigée contre les mélanocytes est dépendante de la voie interféron (IFN) de type 2 (IFNγ). Cependant nos données évoquent l'implication d'une signature IFN de type 1 (IFN-I), mais leur rôle dans la physiopathologie du vitiligo est incomplètement connu. Ce projet vise à mieux caractériser le rôle des IFN-I (IFNα et IFNβ) au cours du vitiligo et d'évaluer leur impact sur le phénotype et la fonction des mélanocytes. Une analyse transcriptomique des cellules épidermiques par « single cell RNA sequencing » réalisée à partir des prélèvements cutanés périlésionnels et non lésionnels de patients atteints de vitiligo retrouve un signal IFN-I au niveau périlésionnel. Alors que les cellules dendritiques plasmacytoïdes produisent de l'IFNα, nous montrons que les kératinocytes stimulés par des agonistes des Toll Like Receptor 3 et 9 produisent de l'IFNβ. Les mélanocytes traités par les IFN-I sont caractérisés par une augmentation d'expression des marqueurs de sénescence tels que la β-galactosidase, p16 et p21; ces observations sont confirmées par analyse par immunofluorescence sur des modèles 3D d'épidermes reconstruits pigmentés avec mélanocytes. Des composants du phénotype de sécrétion associé à la sénescence tels que l'IL-6, IL-8, CCL5, ICAM1, MMP2 sont élevés dans le surnageant des mélanocytes traités par les IFN-I. Enfin, des biopsies cutanées de patients atteints de vitiligo ont été obtenues avant et après 3 et 9 mois de traitement par Baricitinib (BARVIT - NCT04822584), inhibiteur de JAK1/JAK2. Les analyses de l'expression épidermique de voie de signalisation associée aux IFN-I (MX1) et l'expression mélanocytaire de marqueurs de sénescence (p21) sur les biopsies ont montré une diminution de MX1 et de p21 après traitement. Nos résultats suggèrent que les IFN-I sont impliqués dans la perte des mélanocytes en induisant leur sénescence.
Vulnérabilité anatomo-fonctionnelle de la transmission dopaminergique à des manipulations du statut en vitamine A
par Pauline COUTY (Nutrition et Neurobiologie Intégrée)
Cette soutenance a lieu à 14h00 - Amphitéâtre Broca 146 rue Léo Saignat Centre Broca Nouvelle-Aquitaine 33076 Bordeaux Cedex
devant le jury composé de
- Wojciech KREZEL - Directeur de recherche - Université Louis Pasteur de Strasbourg - Rapporteur
- Corinne BEURRIER - Chargée de recherche - Aix-Marseille Université - Rapporteur
- Patrick BOREL - Directeur de recherche - Aix-Marseille Université - Examinateur
- Elodie FINO - Chargée de recherche - Aix-Marseille Université - Examinateur
- Francis CHAOULOFF - Directeur de recherche - Université de Bordeaux - Examinateur
- Katia TOUYAROT - Maîtresse de conférences - Bordeaux INP - Directeur de these
La carence en vitamine A au cours de la période périnatale, causée par un régime appauvri en vitamine A, reste un enjeu de santé publique majeur, notamment dans les pays en voie de développement. En effet, l'acide rétinoïque (AR), le métabolite actif de la vitamine A, est essentiel pour le développement cérébral du fœtus et du nouveau-né, et joue un rôle très important dans les fonctions cérébrales à l'âge adulte. En se fixant sur ses récepteurs nucléaires qui jouent le rôle de facteur de transcription, l'AR régule l'expression de nombreux gènes, notamment impliqués dans la transmission dopaminergique au sein du striatum. D'autre part, une diminution du statut en vitamine A au cours de la gestation chez la mère ou des polymorphismes génétiques des acteurs de la voie de signalisation des rétinoïdes ont été associés à certaines maladies psychiatriques neurodéveloppementales, comme la schizophrénie, en revanche les mécanismes sous-jacents restent à établir. C'est dans ce contexte que s'inscrit cette thèse, dont l'objectif était d'étudier les conséquences d'une carence en vitamine A débutée lors de la gestation chez la souris sur la modulation du métabolisme de la vitamine A et son impact sur la fonctionnalité de la transmission dopaminergique chez la descendance adulte. Nous faisons l'hypothèse qu'une hypoactivité de la signalisation des rétinoïdes pourrait conduire à un dysfonctionnement de la transmission dopaminergique au sein du striatum, caractéristique de certaines pathologies neurodéveloppementales. Dans cette étude, nous montrons qu'une carence périnatale en vitamine A chez la souris induit une hypoactivité de la signalisation des rétinoïdes associée à des altérations de la transmission dopaminergique chez la descendance adulte, qui sont plus prononcées dans le noyau accumbens (NAc) que dans le striatum dorsal. Plus précisément, une diminution d'expression de l'ARNm du transporteur de la dopamine (DAT) et du récepteur dopaminergique 3 (D3R) est observée chez la descendance carencée en vitamine A, au sein de l'aire tegmentale ventrale (ATV) et du NAc, respectivement. Ces altérations neurobiologiques de la voie de transmission dopaminergique mésolimbique s'accompagnent chez la descendance mâle carencée, d'une augmentation des processus motivationnels et de l'impulsivité évalués dans des tâches de conditionnement opérant, contrairement à la descendance femelle carencée qui semble protégée. Pour approfondir l'étude de la transmission mésolimbique, nous avons étudié l'activité dopaminergique mésolimbique in vivo dans notre modèle, en combinant le biosenseur dopaminergique dLight à la photométrie de fibre. Nous avons ainsi montré que la carence périnatale en vitamine A altère la dynamique dopaminergique in vivo, conduisant à une augmentation de la libération de dopamine phasique dans le NAc pendant des tâches de conditionnement opérant. Enfin, le lien causal entre les altérations de la transmission dopaminergique mésolimbique et les altérations comportementales observées chez la descendance carencée en vitamine A a été étudié par l'utilisation d'approches virales (DREADDs) permettant de manipuler l'activité des neurones dopaminergiques. En conclusion, ce travail de thèse démontre l'importance de la signalisation des rétinoïdes, pendant et après la période périnatale, pour maintenir l'intégrité de la transmission dopaminergique mésolimbique. Cette étude suggère que la diminution du statut en vitamine A dans le cadre de plusieurs pathologies psychiatriques neurodéveloppementales pourrait jouer un rôle dans certains aspects de la symptomatologie de ces maladies, tels que les troubles motivationnels ou impulsifs. Ainsi, la supplémentation nutritionnelle en vitamine A pourrait être envisagée comme stratégie nutritionnelle pour prévenir les processus cognitifs altérés par la carence en vitamine A, dans le cadre de ces pathologies, et permettre un développement cérébral normal chez l'enfant.